Типы ключевых питательных сред
DMEM (Dulbecco’s Modified Eagle Medium)
Когда выбирать: если нужен быстрый рост культуры, высокая выживаемость и устойчивость к
стрессовым условиям.
Высокий уровень аминокислот и витаминов делает DMEM удобной для проведения трансфекции,
пролиферационных тестов, исследований сигнальных путей.
Варианты: low glucose (1 г/л), high glucose (4.5 г/л) для быстро делящихся и трансформированных
линий; с пируватом/без пирувата (пируват может повышать устойчивость к окислительному
стрессу).
Типичные линии: HEK293, HeLa, NIH/3T3, фибробласты, C2C12.
стрессовым условиям.
Высокий уровень аминокислот и витаминов делает DMEM удобной для проведения трансфекции,
пролиферационных тестов, исследований сигнальных путей.
Варианты: low glucose (1 г/л), high glucose (4.5 г/л) для быстро делящихся и трансформированных
линий; с пируватом/без пирувата (пируват может повышать устойчивость к окислительному
стрессу).
Типичные линии: HEK293, HeLa, NIH/3T3, фибробласты, C2C12.
RPMI-1640 (Roswell Park Memorial Institute 1640 medium)
Исторически разработана для лимфоидных клеток, содержит повышенное количество витаминов
и некоторые компоненты, которых нет в MEM/DMEM (например, биотин, витамин B12, PABA).
Когда выбирать: работа с клетками иммунной системы и гемопоэтическими линиями, а также
некоторыми опухолевыми культурами.
Подходит для исследований апоптоза, иммунного метаболизма и ROS-ответа, оценки
цитотоксичности (IC50).
Особенности: повышенная концентрация фосфатов (это важно учитывать при некоторых
колориметрических анализах).
Типичные линии: Jurkat, THP-1, K562 и другие гемопоэтические линии.
и некоторые компоненты, которых нет в MEM/DMEM (например, биотин, витамин B12, PABA).
Когда выбирать: работа с клетками иммунной системы и гемопоэтическими линиями, а также
некоторыми опухолевыми культурами.
Подходит для исследований апоптоза, иммунного метаболизма и ROS-ответа, оценки
цитотоксичности (IC50).
Особенности: повышенная концентрация фосфатов (это важно учитывать при некоторых
колориметрических анализах).
Типичные линии: Jurkat, THP-1, K562 и другие гемопоэтические линии.
F-12 (Ham’s F‑12 Nutrient Mixture)
Разрабатывался для клонального роста в условиях низкой сыворотки и содержит более широкий
спектр микроэлементов (в том числе цинк, селен), поэтому часто используется как база для
бессывороточных и сниженно‑сывороточных систем и в смеси DMEM/F‑12 (1:1).
Когда выбирать: если задача сохранить дифференцировку, фенотип и более физиологическое
поведение клеток, близкое к in vivo.
Часто применяется в экспериментах с эпителиальными клетками (A549, MDCK, первичные
эпителии), в токсикологии, 3D-сфероидах.
спектр микроэлементов (в том числе цинк, селен), поэтому часто используется как база для
бессывороточных и сниженно‑сывороточных систем и в смеси DMEM/F‑12 (1:1).
Когда выбирать: если задача сохранить дифференцировку, фенотип и более физиологическое
поведение клеток, близкое к in vivo.
Часто применяется в экспериментах с эпителиальными клетками (A549, MDCK, первичные
эпителии), в токсикологии, 3D-сфероидах.
Сыворотка (FBS)
FBS (fetal bovine serum, фетальная бычья сыворотка) – источник белков, гормонов и факторов
роста, которые поддерживают выживаемость и пролиферацию клеток в культуре. В большинстве
протоколов с DMEM, RPMI и F-12 используют 5–10 % FBS.
Типичные режимы работы с сывороткой:
Конкретные значения зависят от линии и дизайна эксперимента. Для чувствительных линий,
экспериментов, требующих высокой воспроизводимости, рекомендуем FBS Gibco, qualified,(арт.
26140079) или Procell FBS Premium (арт. 164230). Для рутинных задач подойдет стандартный FBS.
роста, которые поддерживают выживаемость и пролиферацию клеток в культуре. В большинстве
протоколов с DMEM, RPMI и F-12 используют 5–10 % FBS.
Типичные режимы работы с сывороткой:
- около 10 % – стандартные условия для роста быстро делящихся и чувствительных линий
- около 5 % – для более устойчивых линий или экспериментов со сниженной сывороткой
- 1–2 % – для индукции дифференцировки или снижения пролиферации
- 0–0.5 % – сывороточное голодание перед стимуляцией в экспериментах с сигнальными
- путями
Конкретные значения зависят от линии и дизайна эксперимента. Для чувствительных линий,
экспериментов, требующих высокой воспроизводимости, рекомендуем FBS Gibco, qualified,(арт.
26140079) или Procell FBS Premium (арт. 164230). Для рутинных задач подойдет стандартный FBS.
Солевые растворы Эрла и Хэнкса: HBSS и EBSS
Это не питательные среды, а дополнение к ним. Они помогают поддерживать стабильный pH и
осмолярность и используются краткосрочно (как правило, не более 2–4 часов).
осмолярность и используются краткосрочно (как правило, не более 2–4 часов).
HBSS (Hanks’ Balanced Salt Solution)
Сбалансированный солевой раствор Хэнкса рассчитан на работу без CO₂. Применяется для
промывки, кратковременного хранения клеток вне инкубатора, а также для диссоциации клеток
(вариант без Ca²⁺/Mg²⁺ используют перед трипсинизацией и для уменьшения слипания).
Когда брать раствор БЕЗ Ca²⁺/Mg²⁺– перед трипсинизацией и при работе, где нужно
минимизировать адгезию и слипание клеток.
Варианты: Gibco HBSS no Ca/Mg (арт. 14175095), Procell D‑HBSS без Ca/Mg/P.R. (арт. PB180321),
Procell HBSS без Ca/Mg/P.R. (арт. PB180323), Procell HBSS без Ca/Mg с P.R. (арт. PB180324).
промывки, кратковременного хранения клеток вне инкубатора, а также для диссоциации клеток
(вариант без Ca²⁺/Mg²⁺ используют перед трипсинизацией и для уменьшения слипания).
Когда брать раствор БЕЗ Ca²⁺/Mg²⁺– перед трипсинизацией и при работе, где нужно
минимизировать адгезию и слипание клеток.
Варианты: Gibco HBSS no Ca/Mg (арт. 14175095), Procell D‑HBSS без Ca/Mg/P.R. (арт. PB180321),
Procell HBSS без Ca/Mg/P.R. (арт. PB180323), Procell HBSS без Ca/Mg с P.R. (арт. PB180324).
EBSS (Earle’s Balanced Salt Solution)
Сбалансированный солевой раствор Эрла рассчитан на работу в CO₂-атмосфере и подходит для
промывок и инкубаций в CO₂-инкубаторе в рамках эксперимента, но не заменяет полноценную
питательную среду.
Когда брать раствор С Ca²⁺/Mg²⁺ – для промывок и кратковременных инкубаций, где важно
сохранить межклеточные контакты и адгезию (например, монослой эпителиальных клеток).
Варианты: Gibco EBSS no Ca/Mg (арт. 14155063), Procell EBSS с Ca/Mg (арт. PB180335 – с P.R.,
арт. PB180336 – без P.R.), Procell EBSS без Ca/Mg (арт. PB180334 – без с P.R., арт. PB180337 – с P.R.)
промывок и инкубаций в CO₂-инкубаторе в рамках эксперимента, но не заменяет полноценную
питательную среду.
Когда брать раствор С Ca²⁺/Mg²⁺ – для промывок и кратковременных инкубаций, где важно
сохранить межклеточные контакты и адгезию (например, монослой эпителиальных клеток).
Варианты: Gibco EBSS no Ca/Mg (арт. 14155063), Procell EBSS с Ca/Mg (арт. PB180335 – с P.R.,
арт. PB180336 – без P.R.), Procell EBSS без Ca/Mg (арт. PB180334 – без с P.R., арт. PB180337 – с P.R.)
Выбор между HBSS и EBSS
HBSS оптимален для работы «вне CO₂»;
EBSS — для поддержания культуры в CO₂‑инкубаторе, где нужно сохранять pH.
Базовое правило: всегда сверяйтесь с паспортом линии и задачей эксперимента. Качество FBS и
стабильность pH/осмолярности не менее важны, чем состав среды.
EBSS — для поддержания культуры в CO₂‑инкубаторе, где нужно сохранять pH.
Базовое правило: всегда сверяйтесь с паспортом линии и задачей эксперимента. Качество FBS и
стабильность pH/осмолярности не менее важны, чем состав среды.
Мини‑алгоритм: что выбрать из нашего каталога
С чего начать выбор:
1. Определите тип клеточной линии (иммунная, эпителиальная, фибробласты, опухолевая).
2. Посмотрите рекомендуемую базовую среду в паспорте линии (ATCC, DSMZ и др.).
3. Уточните задачу эксперимента (рост, дифференцировка, стресс‑тесты, 3D‑культура).
4. Сопоставьте это с таблицей ниже и выберите нужную комбинацию базовой среды, сыворотки и солевого раствора.
1. Определите тип клеточной линии (иммунная, эпителиальная, фибробласты, опухолевая).
2. Посмотрите рекомендуемую базовую среду в паспорте линии (ATCC, DSMZ и др.).
3. Уточните задачу эксперимента (рост, дифференцировка, стресс‑тесты, 3D‑культура).
4. Сопоставьте это с таблицей ниже и выберите нужную комбинацию базовой среды, сыворотки и солевого раствора.
Для критичных проектов (применение высокочувствительных методов, GLP/GMP) мы
рекомендуем использовать линейку Gibco (Thermo Fisher Scientific). Для рутинных задач и
оптимизации бюджета — базальные среды Procell с аналогичными формулами и четкой
спецификацией.
рекомендуем использовать линейку Gibco (Thermo Fisher Scientific). Для рутинных задач и
оптимизации бюджета — базальные среды Procell с аналогичными формулами и четкой
спецификацией.
