Когда выбирать: если нужен быстрый рост культуры, высокая выживаемость и устойчивость к стрессовым условиям. Высокий уровень аминокислот и витаминов делает DMEM удобной для проведения трансфекции, пролиферационных тестов, исследований сигнальных путей. Варианты: low glucose (1 г/л), high glucose (4.5 г/л) для быстро делящихся и трансформированных линий; с пируватом/без пирувата (пируват может повышать устойчивость к окислительному стрессу). Типичные линии: HEK293, HeLa, NIH/3T3, фибробласты, C2C12.
RPMI-1640 (Roswell Park Memorial Institute 1640 medium)
Исторически разработана для лимфоидных клеток, содержит повышенное количество витаминов и некоторые компоненты, которых нет в MEM/DMEM (например, биотин, витамин B12, PABA). Когда выбирать: работа с клетками иммунной системы и гемопоэтическими линиями, а также некоторыми опухолевыми культурами. Подходит для исследований апоптоза, иммунного метаболизма и ROS-ответа, оценки цитотоксичности (IC50). Особенности: повышенная концентрация фосфатов (это важно учитывать при некоторых колориметрических анализах). Типичные линии: Jurkat, THP-1, K562 и другие гемопоэтические линии.
F-12 (Ham’s F‑12 Nutrient Mixture)
Разрабатывался для клонального роста в условиях низкой сыворотки и содержит более широкий спектр микроэлементов (в том числе цинк, селен), поэтому часто используется как база для бессывороточных и сниженно‑сывороточных систем и в смеси DMEM/F‑12 (1:1). Когда выбирать: если задача сохранить дифференцировку, фенотип и более физиологическое поведение клеток, близкое к in vivo. Часто применяется в экспериментах с эпителиальными клетками (A549, MDCK, первичные эпителии), в токсикологии, 3D-сфероидах.
Сыворотка (FBS)
FBS (fetal bovine serum, фетальная бычья сыворотка) – источник белков, гормонов и факторов роста, которые поддерживают выживаемость и пролиферацию клеток в культуре. В большинстве протоколов с DMEM, RPMI и F-12 используют 5–10 % FBS.
Типичные режимы работы с сывороткой:
около 10 % – стандартные условия для роста быстро делящихся и чувствительных линий
около 5 % – для более устойчивых линий или экспериментов со сниженной сывороткой
1–2 % – для индукции дифференцировки или снижения пролиферации
0–0.5 % – сывороточное голодание перед стимуляцией в экспериментах с сигнальными
путями
Конкретные значения зависят от линии и дизайна эксперимента. Для чувствительных линий, экспериментов, требующих высокой воспроизводимости, рекомендуем FBS Gibco, qualified,(арт. 26140079) или Procell FBS Premium (арт. 164230). Для рутинных задач подойдет стандартный FBS.
Солевые растворы Эрла и Хэнкса: HBSS и EBSS
Это не питательные среды, а дополнение к ним. Они помогают поддерживать стабильный pH и осмолярность и используются краткосрочно (как правило, не более 2–4 часов).
HBSS (Hanks’ Balanced Salt Solution)
Сбалансированный солевой раствор Хэнкса рассчитан на работу без CO₂. Применяется для промывки, кратковременного хранения клеток вне инкубатора, а также для диссоциации клеток (вариант без Ca²⁺/Mg²⁺ используют перед трипсинизацией и для уменьшения слипания). Когда брать раствор БЕЗ Ca²⁺/Mg²⁺– перед трипсинизацией и при работе, где нужно минимизировать адгезию и слипание клеток. Варианты: Gibco HBSS no Ca/Mg (арт. 14175095), Procell D‑HBSS без Ca/Mg/P.R. (арт. PB180321), Procell HBSS без Ca/Mg/P.R. (арт. PB180323), Procell HBSS без Ca/Mg с P.R. (арт. PB180324).
EBSS (Earle’s Balanced Salt Solution)
Сбалансированный солевой раствор Эрла рассчитан на работу в CO₂-атмосфере и подходит для промывок и инкубаций в CO₂-инкубаторе в рамках эксперимента, но не заменяет полноценную питательную среду. Когда брать раствор С Ca²⁺/Mg²⁺ – для промывок и кратковременных инкубаций, где важно сохранить межклеточные контакты и адгезию (например, монослой эпителиальных клеток). Варианты: Gibco EBSS no Ca/Mg (арт. 14155063), Procell EBSS с Ca/Mg (арт. PB180335 – с P.R., арт. PB180336 – без P.R.), Procell EBSS без Ca/Mg (арт. PB180334 – без с P.R., арт. PB180337 – с P.R.)
Выбор между HBSS и EBSS
HBSS оптимален для работы «вне CO₂»; EBSS — для поддержания культуры в CO₂‑инкубаторе, где нужно сохранять pH. Базовое правило: всегда сверяйтесь с паспортом линии и задачей эксперимента. Качество FBS и стабильность pH/осмолярности не менее важны, чем состав среды.
Мини‑алгоритм: что выбрать из нашего каталога
С чего начать выбор: 1. Определите тип клеточной линии (иммунная, эпителиальная, фибробласты, опухолевая). 2. Посмотрите рекомендуемую базовую среду в паспорте линии (ATCC, DSMZ и др.). 3. Уточните задачу эксперимента (рост, дифференцировка, стресс‑тесты, 3D‑культура). 4. Сопоставьте это с таблицей ниже и выберите нужную комбинацию базовой среды, сыворотки и солевого раствора.
Задача/сценарий
Тип клеток / особенности
Что выбрать из Gibco (Thermo Fisher Scientifi)
Что выбрать из Procell (Elabscience)
Быстрый рост, трансфекция
HEK293, HeLa, NIH/3T3,
различные опухолевые линии
DMEM high glucose (арт.
11965092)
Procell DMEM High
glucose (арт. PM150210)
Культивирование линий с
более низким уровнем
метаболизма
Первичные культуры,
фибробласты; эксперимент
требует длительного
культивирования
Культивирование с
пониженным
содержанием сыворотки
Эксперимент требует
снижение FBS, добавление
других факторов
DMEM/F-12 (арт.
11320033)
Procell DMEM/F12
(арт. PM150312)
Для критичных проектов (применение высокочувствительных методов, GLP/GMP) мы рекомендуем использовать линейку Gibco (Thermo Fisher Scientific). Для рутинных задач и оптимизации бюджета — базальные среды Procell с аналогичными формулами и четкой спецификацией.